Направленная лазерная подсветка iLas2 

Двухлазерный осветитель для TIRF-микроскопии и одновременного направленного лазерного воздействия.

iLas2 — это уникальная оптическая система для управления лазерным освещением в режиме реального времени. Она может выполнять ряд целевых лазерных экспериментов, которые включают фотоманипуляцию (т. е. FRAP, абляцию и фотоактивацию) и 360° TIRF (т. е. визуализацию одной молекулы, суперразрешение, лазерную подсветку в темном поле и секционирование при косом освещении).

Ключевые преимущества системы направленной лазерной подсветки iLas2

• "Круговой" TIRF устраняет бахромчатые и кольцевые артефакты.
• Большое поле зрения с высокой однородностью.
• Многоволновость и многоглубинность в реальном времени.
• Косое освещение для 3D STORM.

Система iLas2 в сочетании с Cairn MultiLine или TriLine LaserBank представляет собой готовый осветитель для TIRF, FRAP и смежных методов. Полная система включает в себя две гальванометрические сканирующие головки для точного наведения на плоскости поля и апертуры. В сочетании с объективом с высокой NA и подходящей рамой исследовательского микроскопа система iLas2 TIRF быстро определяет кольцевую зону вокруг объектива, чтобы производить TIRF или косое освещение из нескольких мест одновременно, обеспечивая непревзойденную равномерность освещения. Вторая сканирующая головка позволяет создавать сложные узоры на образце с очень высокими уровнями интенсивности для фотолиза, оптогенетики и FRAP. Ультрафиолетовая лазерная система дополняет линейку для повреждений ДНК и других приложений, требующих фотоабляции.

Быстрый сканирующий многоглубинный TIRF

По нашему теоретическому мнению и опыту, лучший способ получения TIRF-изображений через объектив микроскопа — это вызвать эванесцентную волну из как можно большего числа точек по окружности объектива, чтобы усреднить кольцевые и бахромчатые артефакты. Используя пару быстрых гальванометрических зеркал для гибкого сканирования задней фокальной плоскости объектива в каждом кадре камеры, система ILAS 2 достигает этого, а также позволяет осуществлять косое освещение, многоволновую коррекцию глубины и широкопольную визуализацию от одного и того же лазерного источника.

ILAS 2 в сочетании с MultiLine LaserBank, объективом 1,49NA и аппаратным инвертированным микроскопом с автофокусировкой составляет основу систем визуализации одиночных молекул от Cairn.

Системы, построенные на базе ILAS2 с программным обеспечением MetaMorph, чрезвычайно гибкие, поскольку головка ILAS имеет возможность установки дополнительной пары гальвосканеров для FRAP / OptoGenetics / Photolysis, а также дополнительный обходной порт для стандартной (нелазерной) широкопольной визуализации. Мы конфигурируем системы с EM или sCMOS камерами, а иногда и с обеими, используя адаптер TwinCam.

Мощный интерфейс управления в MetaMorph позволяет автоматически настраивать углы TIRF для различных цветов и быстро переключаться между широкопольным, TIRF и косым освещением. Это также предпочтительный источник освещения для 2D и 3D систем STORM в реальном времени, использующих насадку Cairn zoom для достижения высокой интенсивности, необходимой для стандартных диодных лазеров.

Ключевые особенности iLas2

• непревзойденная однородность в TIRF и HILO;
• калиброванные угол и глубина проникновения;
• одновременный многоканальный TIRF;
• FRAP на лету;
• одновременная глубина проникновения на нескольких длинах волн;
• одновременный TIRF и FRAP;
• 3D TIRF с суперразрешением;
• PALM/STORM/PAINT.

Технические характеристики системы направленной лазерной подсветки iLas2

Оптические 

• Диапазон длин волн: 350 - 1800 нм.
• Подключение: Порт подсветки.
• Оптоволоконные входы: Одномодовый PM FC/APC.

FRAP/PA контроль

• Модуляция интенсивности: 0-100%.
• Скорость сканирования: 30 000 Гц.
• Внешняя модуляция: да.
• Время отклика: 1 мс.
• Связь: USB2.0.
• Мульти-ROI, режим реального времени: да.

TIRF контроль

• Модуляция интенсивности: 0-100%.
• Время поворота: 5 мс / поворот.
• Режим вращения: Круг, дуга, точка.
• Внешняя модуляция: да.
• Время отклика: <1 мс.
• Связь: USB2.0.
• 3D TIRF - θscan: да.

Совместимость

• LEICA
• NIKON
• OLYMPUS
• ZEISS
• METAMORPH
• MICRO-MANAGER
• VISIVIEW

Размеры двухлазерного осветителя iLas2

Области применения системы направленной лазерной подсветки iLas2

• Локализация и отслеживание одиночных молекул.
• Кинетические исследования одномолекулярных взаимодействий (например, связывание лигандов, взаимодействие белок-белок и белок-ДНК).
• Кинетические исследования белков (например, актиновых нитей и микротрубочек).
• Методы сверхразрешения (например, PALM/STORM) для субдифракционной локализации отдельных молекул.
• Изображение клеточной динамики (например, процессов секреции и движения везикул, динамики плазматической мембраны, динамики цитоскелета).
• Визуализация органелл, расположенных близко к плазматической мембране (например, митохондрии, ЭР, лизосомы).
• Изображение активности ионных каналов в плазматической мембране и ЭР (например, кальциевая сигнализация).
• Визуализация клеточной сигнализации (движение и привлечение ионных каналов, рецепторов, G-белков и т. д.).