Популярные методы микроскопии для исследования живых объектов 

В науках о жизни было разработано множество методов микроскопии для изучения биологических организмов и лежащих в их основе биохимических и молекулярных процессов. Поэтому исследования в области наук о жизни могут охватывать много порядков по масштабу, от изучения отдельных молекул до целых модельных организмов.

Сравнительные размеры биологических объектов и химических структур.

Для исследований в области наук о жизни доступен широкий спектр методов микроскопии. На рисунке ниже приведен краткий обзор доступных экспериментальных методов, представленных в зависимости от поля зрения и бокового разрешения. Расшифровка аббревиатур, используемых в области микроскопии, приведено в таблице ниже.

Сравнение методов микроскопии по разрешению и полю зрения.

CLEM

Корреляционная световая и электронная микроскопия сочетает в себе разрешение электронной микроскопии с простотой маркировки световой микроскопии. CLEM не является единственным, четко определенным приложением. Более подробную информацию можно найти в обзоре Boer et al.4

Конфокальная микроскопия

Существует несколько различных типов конфокальной микроскопии, включая:

• конфокальная лазерная;
• сканирующая микроскопия;
• {CSLM) или конфокальная микроскопия с вращающимся диском.

Подробнее о конфокальной технологии и преимуществах конфокальной системы Dragonfly компании Andor читайте в отдельной статье на нашем сайте.

FCS

Флуоресцентная корреляционная спектроскопия использует корреляционный анализ для определения изменений интенсивности флуоресценции.

FCS может использоваться для изучения биохимических реакций и скорости диффузии в живых клетках путем определения концентрации флуоресцентных молекул.1

СЭМ (SEM)

Сканирующая электронная микроскопия. Сканирует топологию образца электронным лучом.

СЭМ сложна для биологических образцов, поскольку по условиям эксперимента объект должен находиться в высоком вакууме, что означает, что образцы должны быть сухими.

SIM

Микроскопия со структурированным освещением использует метод узорчатого освещения для достижения улучшенного разрешения при низкой интенсивности света.

SRRF

Радиальные флуктуации сверхразрешения — это комбинация анализа временных флуктуаций и локализационной микроскопии.

Реализация компанией Andor технологии SRRF-Stream позволяет проводить микроскопию сверхразрешения в режиме реального времени.5

Суперразрешение

Методы микроскопии со сверхразрешением повышают разрешение ниже дифракционного предела света, к ним относятся такие методы, как PALM, STED и STORM.2

TEM

В просвечивающей электронной микроскопии пучок электронов пропускается через образец, формируя изображение с улучшенным разрешением по сравнению со световой микроскопией.

Образцы для TEM обычно имеют толщину < 100 нм и требуют тщательной подготовки.

TIRF

Флуоресцентная микроскопия с полным внутренним отражением использует оптический эффект, наблюдаемый на границе раздела двух сред с различными показателями преломления. Полный внутренне отраженный свет на этой границе раздела простирается на ~100 нм вглубь образца.

TIRF часто используется для изучения взаимодействий на плазматической мембране.3

Широкопольная микроскопия

В широкопольной микроскопии весь образец освещается одновременно, обычно с использованием светодиода или лампы в качестве источника освещения.

Методика TIRF может быть реализована с помощью широкопольной микроскопии.

В приведенной выше таблице расшифрованы некоторые из распространенных аббревиатур и их полные названия. Следует отметить, что CLEM — это смесь различных методов электронной и световой микроскопии, а не одно четко определенное применение. Более подробную информацию можно найти в обзоре Boer et al.

Чтобы познакомиться с общими принципами микроскопических методик, прочтите наш теоретический обзор. А если вы уже готовы купить микроскоп или сопутствующие аксессуары для него, заходите в наш каталог и выбирайте!